Biokeemiliste testide tüübid, millised need on ja mis on tähtsad



The biokeemilised testid mikrobioloogias on need keemiliste testide kogum, mis viiakse läbi proovis leiduvate mikroorganismide identifitseerimiseks; Need mikroorganismid on tavaliselt bakterid. Mikrobioloogile on olemas suur hulk biokeemilisi teste.

Nende testide valik põhineb siiski esialgsetel tulemustel, näiteks Grami värvimustril ja kasvumärkidel, mis võimaldavad bakteritel määrata teatud kategooria. Biokeemilised testid põhinevad peamiselt iga bakteritüübi ainevahetuse omadustel. 

Mitte kõikidel bakteritel ei ole samu omadusi, mistõttu uuritakse, kas neil on substraadi lisamise ja reaktsiooni tekkimise ajaks konkreetne ensüüm. Tavaliselt on see määramine antud söötme värvi või pH muutuse abil.

Bakteri usaldusväärseks identifitseerimiseks kuni liigi tasemeni on sageli vaja vähem kui 15 biokeemilist testi. Rohkem biokeemiliste testide läbiviimine võib suurendada usku identifitseerimisse.

Enamik neist biokeemilistest testidest viiakse läbi seerumis või vereplasmas. Siiski võib neid teha ka teistes bioloogilistes sekretsioonides nagu uriin, tserebrospinaalvedelik, pleura vedelik ja väljaheide..

Indeks

  • 1 Klassifikatsioon
    • 1.1 Universaalne
    • 1.2 Erinevused
    • 1.3 Konkreetsed
  • 2 Biokeemiliste testide tüübid
    • 2.1 Katalaasi test
    • 2.2 Oksüdaasi test
    • 2.3 Soolatud mannitooli agari (MSA) test
    • 2.4 Koagulaasikatse
    • 2.5 Ureaasi test
  • 3 Millised on biokeemilised testid??
  • 4 Tähtsus
  • 5 Viited

Klassifikatsioon

Biokeemilisi teste võib jagada 3 rühma:

Universaalne

Need on katsed, mida saab teha mis tahes prooviga ja mis suunavad mikrobioloogi järgmistele biokeemilistele testidele, mis tuleb teha usaldusväärse identifitseerimise saamiseks..

Näide

Katalaasi ja oksüdaasi test.

Erinevused

Need on testid, mis viiakse läbi proovis leiduvate mikroorganismide identifitseerimiseks kuni liikide tasemeni.

Identifitseerimine põhineb testide kombinatsiooni tulemustel, kuna individuaalsed tulemused ei ole identifitseerimiseks piisavalt informatiivsed.

Näide

IMViC testid ja suhkru testid.

Spetsiifiline

Need on spetsiifilised testid teatud liikide või liikide alamtüübi jaoks. Need katsed tehakse tavaliselt alamliigi tasandil kinnitamiseks või tuvastamiseks. Individuaalsed testid on ise informatiivsed.

Näide

Y-glutamüülaminopeptidaasi test.

Biokeemiliste testide tüübid

Katalaasi test

Katalaasi test on katse, mis näitab katalaasi ensüümi olemasolu, lagundades vesinikperoksiidi hapnikuks ja veeks. Väikeses koguses baktereid lisatakse tilgale vesinikperoksiidi (3%).

Katalaasil test on lihtne test kasutada mikrobioloogid aidata selgitada liiki bakterid ja võime määramiseks mõned mikroobid lagunevad vesinikperoksiidi tootmiseks ensüümi katalaasi.

Hapniku mullide jälgimisel tähendab see, et bakteril on katalaasi ensüüm, sest see katalüüsib vesinikperoksiidi lagunemist hapnikuks ja veeks. Siis öeldakse, et organism on katalaas-positiivne (näiteks: Staphylococcus aureus).

Oksüdaasi test

Seda testi kasutatakse tsütokroom-oksüdaasi ensüümi sisaldavate mikroorganismide (mis on olulised elektronide transpordiahelas) identifitseerimiseks. Seda kasutatakse tavaliselt perekondade Enterobacteriaceae ja Pseudomadaceae eristamiseks.

Tsütokroomi oksüdaas kannab elektronide transportimise ahelast elektronid hapnikku (viimane elektron-aktseptor) ja vähendab seda veega. Oksidaasi testid pakuvad kunstlikke elektronidoonoreid ja aktseptorimolekule.

Kui elektronidoonor oksüdeeritakse tsütokroomi oksüdaasi toimel, muutub söötmevärv tumepunaks ja seda peetakse positiivseks tulemuseks. Mikroorganism Pseudomonas aeruginosa on positiivse oksüdaasi bakteri näide.

Soolatud mannitooli agari test (MSA)

Seda tüüpi test on nii valikuline kui ka diferentsiaalne. MSA valib organismid, mis on võimelised elama kõrge soolasisaldusega keskkondades, nagu näiteks liigid Staphylococcus erinevalt. \ t Streptococcus, mille kasv on neis tingimustes inhibeeritud.

Selle katse diferentsiaalkomponent on mannitool. Organismid, mis on võimelised kasutama mannitooli toiduallikana, toodavad kääritamisel kõrvalsaadusi, mis on happelised ja seega alandavad sööde pH-d..

Söötme happesus põhjustab pH indikaatori, fenoolpunase, kollase värvuse. Selle meetodiga diferentseeritavate bakteriliikide näited on järgmised: Staphylococcus aureus (positiivne, sest see fermenteerib mannitooli) ja Staphylococcus epidermidis (negatiivne, sest mannitool ei fermenteeru).

Koagulaasikatse

Koagulaas on ensüüm, mis aitab vereplasma koaguleerida. See katse tehakse positiivsete grampositiivsete ja katalaas-positiivsete bakterite tuvastamiseks Staphylococcus aureus (positiivne koagulaas) Tegelikult on koagulaas selle bakteri liigi virulentsustegur.

Selle bakteri poolt põhjustatud nakkuse tekkimine kaitseb seda tõenäoliselt fagotsütoosi eest. See test on väga kasulik, kui soovite vahet teha Staphylococcus aureus teiste liikide liigist Staphylococcus mis on negatiivne koagulaas.

Ureaasi test

Seda testi kasutatakse karbamiidi hüdrolüüsimiseks võimete bakterite identifitseerimiseks, kasutades ensüümi ureaasi. Seda kasutatakse tavaliselt soo eristamiseks Proteus teiste enteeriliste bakterite suhtes.

Uurea hüdrolüüs toodab ammoniaaki kui üht selle saadust. See nõrk alus suurendab pH väärtust üle 8,4 ja pH indikaator (fenoolpunane) muutub kollasest roosaks. Positiivse ureaasi bakteri näiteks on Proteus mirabilis.

Millised on biokeemilised testid??

Mikrobioloogiliste haiguste diagnoosimiseks ja nende vastu võitlemiseks manustatud haiguste jälgimiseks kasutatakse mikrobioloogilisi biokeemilisi teste. Lisaks kasutatakse neid nakkushaiguste skriinimiseks ja nende prognoosimiseks..

Mikroorganismide biokeemiline identifitseerimine annab ettekujutuse sellest, mida need mikroorganismid on võimelised tegema, olles samasuguste liikide erinevate tüvede diskrimineerimine spetsiifiliste biokeemiliste profiilidega..

Spetsiifiliste ensümaatiliste aktiivsuste erinevused annavad teavet mikroorganismi ökoloogia, füsioloogia või loodusliku elupaikade kohta, mida võib mõnel juhul pidada oluliseks informatsiooniks.

Olulisus

Bakterite kuju, suuruse ja paigutusega seotud struktuurilised erinevused aitavad identifitseerimisprotsessis väga vähe aidata, sest seal on palju sarnase kuju, suuruse ja paigutusega baktereid..

Sel põhjusel põhineb bakterite identifitseerimine peamiselt nende biokeemiliste toimete erinevustel.

Igal bakteriliigil on täpselt määratletud metaboolse tegevuse kogum, mis erineb kõigist teistest liikidest. Need biokeemilised "sõrmejäljed" on omadused, mida kontrollivad bakteriaalsed ensüümid.

Seega on biokeemilised testid olulised, sest nad aitavad uurijal proovis leiduvaid patogeene õigesti identifitseerida ja sel viisil soovitada patsiendile sobivat ravi..

Viited

  1. Beckett, G., Walker, S. & Rae, P. (2010). Kliiniline biokeemia (8. väljaanne). Wiley-Blackwell.
  2. Clarke, P. H., & Cowan, S. T. (1952). Bakterioloogia biokeemilised meetodid. Journal of General Microbiology, 6(1952), 187-197.
  3. Gaw, A., Murphy, M., Srivastava, R., Cowan, R., St, D. & O'Reilly, J. (2013). Kliiniline biokeemia (5. väljaanne). Elsevier Health Sciences.
  4. Goldman, E. & Green, L. (2008). Mikrobioloogia praktiline käsiraamat (2. väljaanne). CRC Press.
  5. Harrigan, W. (1998). Laboratoorsed meetodid toidu mikrobioloogias (Kolmas väljaanne). Academic Press.
  6. Vasanthakumari, R. (2009). Praktiline mikrobioloogia. BI väljaanded Pvt Ltd.