Toitev agarialus, valmistamine ja kasutamine



The toitev agar see on mitteselektiivne ja diferentsiaalne tahke kultuurikeskkond. Selles keskkonnas kasvavad igasugused bakterid, mis ei nõua toitumisalast vaatenurka.

See on lihtne vahend ja selle nimetusest hoolimata sisaldab see madalamat toiteväärtust võrreldes teiste sarnaste söötmetega, nagu aju südame infusiooniagar või trüptikaasi sojaagar..

Selle kasulikkus laboris on väga erinev. Peamiselt kasutatakse liikide subkultuuriks, tüvede säilitamiseks, kolooniate loendamiseks, muu hulgas vere agari valmistamiseks..

Samuti on tänu oma kergelt beeži värvile mõnede bakteritüvede poolt tekitatud pigmentide, nagu näiteks rohekas pigmendi, tootmine. Pseudomonas aeruginosa, - toodetud tellistest punane pigment Serratia marcescens toatemperatuuril kuldkollane pigment Staphylococcus aureus, muu hulgas.

Lisaks on see üks kõige ökonoomsemaid kasvusubstraate turul.

Indeks

  • 1 Sihtasutus
  • 2 Koostis
  • 3 Valmistamine
  • 4 Kasutamine
    • 4.1 Vere agari valmistamise aluseks
    • 4.2 Storeerivate bakterite sporulatsiooni stimuleerimine
    • 4.3 Tüve hooldus
    • 4.4 Kolooniate loendamine
    • 4.5 Diagnostiliste testide läbiviimine
    • 4.6 Mesofiilse aeroobse puhke soola vee (rannad) taastamine
  • 5 Viited

Sihtasutus

Nagu juba mainitud, on see väga lihtne vahend, mis põhineb toitainete lisamisel bakterite kasvuks ilma piiranguteta ja ilma keeruliste reaktsioonide tekkimiseta.

Kuna keskkond on poolläbipaistev, sobib see ideaalselt kolooniate loendamiseks sügavusel külvamise meetodil.

Koostis

See koosneb peamiselt lihaekstraktist või pärmiekstraktist, peptoonidest või pankrease želatiinist, agar-agarist, naatriumkloriidist ja destilleeritud veest..

Liha või pärmi ja peptoonide ekstrakt kujutab endast süsiniku ja oluliste mineraalide (lämmastik, fosfor ja väävel) allikaid, mida bakterid kasutavad energiaallikana ja kasvufaktoritena.

Samuti on agar-agar kõigi tahkete kasvusubstraatide alus, mis asendab želatiini, mis oli Robert Kochi esimene alusühend, mis andis oma kandja tahke konsistentsi..

Agar on galaktoosist, galaktomannaanist, agaroosist ja agaropektiinist koosnev polüsahhariid. See on 40 ° C juures ja sulab peaaegu 100 ° C.

Naatriumkloriid annab omakorda sööde, mille osmolaarsus on bakterite arenguks vajalik.

Lõpuks on vesi lüofiliseeritud ühendite hüdraatimiseks ja lahustamiseks. Kasutada tuleks destilleeritud vett, mis on reguleeritud neutraalse pH tasemeni. Kraanivesi ei tohiks kasutada, sest see sisaldab kaltsiumi ja magneesiumi, mis võib reageerida söötme fosfaatidega ja moodustada lahustumatud soolad.

Ettevalmistus

Ühe liitrise toitainega agari puhul tuleb kaaluda 31 g veetustatud söödet. See asetatakse fooliumisse ja lahustatakse liitris destilleeritud vees. Pärast 5-minutilist puhkeaega soojendage soojusallikat ja segage pidevalt, kuni see keeb 1 või 2 minutit.

Seejärel asetage fiola autoklaavi ja steriliseeritakse 121 ° C juures 20 minutit.

Selle aja möödudes eemaldatakse see autoklaavist ja seda serveeritakse steriilsetes Petri tassides, kasutades laminaarset voolu või Bunsen-põleti..

Kui Petri tassid on ühekordselt kasutatavad (plastik), tuleks sööde jaotada, kui agari temperatuur on umbes 50 ° C, et vältida nende liigset kuumenemist..

Lastakse tahkuda ja hoidma plaadihoidikus ümberpööratud ja külmkapis temperatuuril 2-8 ° C kuni kasutamiseni.

Plaadid tuleb enne külvamist karastada. Toitev agariplaate ei tohi kasutada, kui need on saastunud või veetustatud.

Valmistatud söötme pH tuleb reguleerida 7,3 ± 0,2-ni.

Kasutamine

See on mikrobioloogia laboris kasutatav kõige lihtsam kultiveerimiskeskkond. Selle koostis on suurepärane nõudlike bakterite kasvuks.

Selle peamised kasutusalad on selgitatud allpool:

Vere agari valmistamise alusena

Seda söödet kasutatakse mõnikord vere agari valmistamiseks, kuid see ei ole kõige sagedamini kasutatav alus.

Stimuleerida spooride moodustumist baktereid

See kultiveerimiskeskkond on eriti kasulik spooride moodustumise bakterite, nagu näiteks sporulatsiooni stimuleerimiseks Bacillus sp.

Selleks külvatakse perekonna tüvi Bacillus ja inkubeeriti 24 tundi 37 ° C juures aerobioosis. Kui kolooniad on kasvatatud, allutatakse plaat temperatuurile, st ahju temperatuur tõuseb 44 ° C-ni ja jäetakse 24 tunniks rohkem või lisatakse külmkapis 24 tundi..

Kultuuri lõppedes kasvatatakse kultuure ja värvitakse Grami värviga või Shaeffer-Fultoni spooridega. Nendes täheldatakse baktereid, millel on endosporid (spoorid batsilli sees) ja exospores (spoorid väljaspool bacillust)..

Tüve hooldus

Mõned teaduslaborid või ülikoolide õpetamise tugilaborid peavad säilitama elujõulisi kliiniliselt olulisi baktereid nii kaua kui võimalik, et kasutada bakteripanku (bakterioteka) teadustööks või õpetamispraktika ettevalmistamiseks. Õpilased õpivad neid mikroorganisme manipuleerima ja tuvastama.

Selleks võib kasutada nii toitainerarit kui ka aju südame infusiooniagarit. Agar valmistatakse, valatakse bakeliidiga kaetud torudesse ja kallutatakse alusele sellisel viisil, et agar tahkestub, moodustades põhja ja kalde pinnale (flööti piik).

Iga toru on märgistatud istutatavate bakterite nime ja kuupäeva järgi. Klaasil istutatakse kõik bakterid ja inkubeeritakse 24 tundi, kui kolooniad on kasvatatud, säilitatakse torusid toatemperatuuril..

Bakterioteki tuleb uuendada 1 kuni 3 kuuni, et vältida sööda saastumist ja dehüdratsiooni ning bakterite surma..

Sel viisil saab säilitada ainult mittevajalikke baktereid.

Kolooniate loendamine

Kuigi on olemas spetsiaalsed vahendid kolooniate loendamiseks, näiteks standardarvu agar, võib selleks kasutada toitainerarit, kas külvades pinnale drigalski spaatliga või sügavusel. Seetõttu on see väga kasulik toidu ja vee mikrobioloogilisel analüüsil.

Diagnostiliste testide läbiviimine

Kuna tegemist on söötmega, mis ei sisalda verd ega muud lisaaineid, on ideaalne, et võtta selles keskkonnas kasvatatud kolooniad katalaasi testi läbiviimiseks.

Sarnaselt oma selge värvuse tõttu on näidatud, et oksüdaasikatsed viiakse läbi otse külvatud agari piirkonnas ilma häireteta.

Mesofiilse aeroobse puhke soola vee (rannad) taastamine

10% merevees valmistatud toitaineagar on kasulik mesofiilsete aeroobide hindamiseks rannavetes.

Sel moel saame hinnata, milline on nende mikroorganismidega veekogude reaalne saastatus, sest seda tüüpi proovides kattuvad tulemused tavapärasel viisil valmistatud kultuurikeskkonna kasutamisel.

Seda tõestas Cortez et al. aastal 2013. aastal.

See on seletatav järsu muutuse tõttu, mida bakterid hüper-füsioloogilisest keskkonnast madalale soolakeskkonnale üleminekul läbivad, mistõttu mikroorganismid sisenevad letargiase, kus nad on elujõulised, kuid mitte kultiveeritavad.

Viited

  1. "Toitev agar." Wikipedia, vaba entsüklopeedia. 13 september 2016, 20:33 UTC. 29. detsember 2018, 21:04 en.wikipedia.org
  2. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey & Scott'i mikrobioloogiline diagnoos. 12 ed. Argentina Panamericana S.A Toimetaja.
  3. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobioloogiline diagnoos. (5. väljaanne). Argentina, Redaktsioon Panamericana S.A..
  4. Cortez J, Ruiz Y, Medina L, Valbuena O. Mereveega valmistatud söötme mõju terviseindikaatoritele Chichiriviche spaades, Falcón osariigis, Venezuelas. Rev Soc Come Microbiol 2013; 33: 122-128
  5. Paredes V, Dias V, Silva de Almeida M ja Cardoso M. Vesi mikrobioloogiline kvaliteet annustamiseks, Suinos.Cient.Agro.Amaz. 2013; 1 (2): 42-49.
  6. García P, Paredes F, Fernández del Barrio M. (1994). Praktiline kliiniline mikrobioloogia. Cadizi ülikool, 2. väljaanne. UCA väljaannete talitus.