MacConkey Agari vundament, ettevalmistamine ja kasutamine



The MacConkey agar See on tahke kultuurikeskkond, mis võimaldab Gram-negatiivsete batsillide eksklusiivset eraldamist. Sel põhjusel on see selektiivne keskkond ja võimaldab eristada laktoosi kääritamist ja mitte-kääritamist, mis muudab selle diferentsiaalseks keskkonnaks. See on mikrobioloogia laboris üks levinumaid söötmeid.

Seda söödet kasutatakse peamiselt perekonnale kuuluvate gramnegatiivsete batsillide eraldamiseks Enterobakterid, sealhulgas oportunistlikud ja enteropatogeensed liigid.

Seda võib kasutada ka teiste gastrointestinaaltraktis elavate enteeriliste bakterite isoleerimiseks, kuid need ei kuulu Enterobakterid, nagu Aeromonas sp, Plesiomonas sp, muu hulgas.

Lõpuks võib see isoleerida teisi gramnegatiivseid, mitte-kääritavaid glükoosibaktereid, mida leidub keskkonnas, vees või pinnases, kuid mis võivad mõnikord olla oportunistlikud patogeenid, nagu näiteks Pseudomonas sp, Acinetobacter sp, Alkaline sp, Chromobacterium violaceum, Stenotrophomonas maltophilia, muu hulgas.

Indeks

  • 1 Sihtasutus
    • 1.1 MacConkey agar
  • 2 Valmistamine
  • 3 Tavalise MacConkey agari kasutamine
  • 4 MacConkey agari muud variandid
    • 4.1 MacConkey agar koos sorbitooliga
    • 4.2 MacConkey agar ilma kristallvioletita või soola
    • 4.3 MacConkey agar koos tsefoperasooniga
    • 4.4 MacConkey Agar, mis on valmistatud 10% merevee mahust
  • 5 Viited

Sihtasutus

MacConkey Agar

Selle vahendi vundamenti saab seletada selle komponentide kirjeldusega, sest igaühel on eesmärk, mis määrab selle vara.

Sapphappe soolad ja lilla kristallid

Selles mõttes on MacConkey agaril keeruline koostis. Kõigepealt sisaldab see sapphappe sooli ja violetseid kristalle.

Need elemendid vastutavad grampositiivsete bakterite ja mõnede nõudlike gramnegatiivsete bakterite kasvu pärssimise eest. See omakorda soosib gramnegatiivsete batsillide arengut, mida need ained ei mõjuta. Seetõttu on see valikuline meedia.

Väidetakse, et see on veidi selektiivne võrreldes teiste söötmetega, mis inhibeerivad ka grampositiivsete bakterite ja ka enamiku gramnegatiivsete bakterite kasvu.

See on äärmiselt selektiivne konkreetse perekonna, näiteks TCBS agari suhtes Vibrio cholerae ja muud sarnased halofiilsed ja alkalofiilsed liigid.

Peptoonid, polütoonid ja laktoos

Sisaldab aineid, mis annavad sellises keskkonnas arenevatele mikroorganismidele vajalikke toitaineid, nagu näiteks peptoonid, polütoonid ja laktoos.

Laktoos on keskse tähtsusega, et keskkond oleks diferentseeritud söötmeks, sest mikroorganismid, mis on võimelised laktoosi kääritama, tekitavad tugevad roosad kolooniad.

Mõned bakterid võivad kääritada laktoosi aeglaselt või nõrgalt, tekitades kahvatu roosad kolooniad ja jäävad positiivseks laktoosiks.

Need, kes ei fermenteeri laktoosi, kasutavad energiaallikana peptione, mis toodavad ammoniaaki, leelistavad keskkonda. Seetõttu on kolooniad, mis on pärit, värvitu või läbipaistev.

PH indikaator

Värvimuutus saavutatakse teise olulise ühendi abil, millel on MacConkey agar. See ühend on pH-indikaator, mis antud juhul on neutraalne punane.

Laktoosi kääritamine tekitab segatud hapete tootmist. Nad hapustavad söödet pH väärtusega alla 6,8..

See põhjustab pH-indikaatori pöördumise intensiivse roosa tooni poole. Värvi intensiivsus võib varieeruda sõltuvalt lõplikust pH-st.

Destilleeritud vesi, naatriumkloriid ja agar

Teisest küljest sisaldab see destilleeritud vett ja naatriumkloriidi, mis annab söötmele hüdratatsiooni ja osmootse tasakaalu. Lõpuks sisaldab sööde agarit, mis on alus, mis tagab tahke keskkonna konsistentsi.

Valmistatud MacConkey agarikeskkonna pH peab olema reguleeritud väärtusele 7,1 ± 0,2..

Ettevalmistus

Ühe liitri MacConkey agari puhul tuleb kaaluda 50 g veetustatud söödet, seejärel asetada fiolile ja lahustada ühes liitris destilleeritud vees. Pärast 10-minutilist puhkeaega kuumutatakse seda pidevalt segades, kuni keeb 1 minut.

Seejärel asetage fiola autoklaavi ja steriliseeritakse 121 ° C juures 20 minutit. Aja möödudes eemaldatakse see autoklaavist ja lastakse jahtuda temperatuurini 45 ° C, seejärel serveeritakse steriilsetes Petri tassides laminaarse voolukapiga või Bunsen-põleti ette..

Lastakse tahkuda ja hoidma plaadihoidikus ümberpööratud ja külmkapis temperatuuril 2-8 ° C kuni kasutamiseni.

Selleks, et saada MacConkey agar, mis inhibeerib Proteus perekonna tekitatavat toimet, kasutatakse väikese soolaga MacConkey agarit..

Tavalise MacConkey agari kasutamine

MacConkey agar on kaasatud kõikidesse kultuurikeskkondadesse, mis on korraldatud laboris saadud kliiniliste proovide külvamiseks. See on kasulik ka toidu mikrobioloogias ja keskkonna mikrobioloogias.

Selles söötmes kasvavad gramnegatiivsed batsillid väljendavad fenotüüpilisi omadusi, mis aitavad kõnealuste liikide eeldatavat diagnoosi. Näiteks on kolooniate suurus, värvus, järjepidevus ja lõhn omadus, mis võib juhtida.

Selles keskkonnas, liigid Escherichia coli, Klebsiella sp ja Enterobacter sp toota tugevaid roosa kolooniaid, mida ümbritseb sadestunud sapi ala.

Nii palju, bakterid nagu Citrobacter sp, Providencia sp, Serratia sp ja Hafnia sp need võivad ilmuda ilma värvita 24 tunni pärast või kahvaturoosa 24-48 tunni jooksul.

Samuti toodavad perekonnad Proteus, Edwadsiella, Salmonella ja Shigella värvituid või läbipaistvaid kolooniaid.

MacConkey agari muud variandid

MacConkey agaril on ka teisi variante, millel on spetsiifilised eesmärgid. Järgnevalt mainitakse neid:

MacConkey agar koos sorbitooliga

See söötme eesmärk oli eristada enteropatogeenset tüve (Escherichia coli enterohemorrhagic O157: H7) ülejäänud. \ t Escherichia coli.

See keskkond muudab sorbitooli jaoks süsivesikute laktoosi. Tüved E. coli enterohemorraagiline O157: H7 erineb ülejäänud, sest nad ei fermenteeri sorbitooli ja seetõttu saadakse läbipaistvad kolooniad, kuid ülejäänud tüved E. coli kui nad fermenteerivad sorbitooli ja kolooniad on tugevad roosad.

MacConkey Agar ilma kristallvioletita või soola

See agar erineb palju klassikalisest MacConkey agarist, kuna sellel ei ole kristallvioletti, võivad Gram-positiivsed bakterid kasvada.

Teisest küljest pärsib soola puudumine mõningate enteeriliste bakterite poolt toodetud agarite, näiteks perekonda kuuluvate agarite teket. Proteus, ja hõlbustavad seega kõigi olemasolevate bakterite, sealhulgas grampositiivsete bakterite isoleerimist.

MacConkey agar koos tsefoperasooniga

See MacConkey agari variant oli kavandatud algselt isoleerima Laribacter hongkongensis ja hiljem mõistsid nad, et see on kasulik Arcobacter butzleri. AMõlemad on kergelt kumerad negatiivsed grammibakterid, mis on resistentsed tsefoperasooni suhtes.

Neid baktereid on hiljuti seostatud Aasia ja Euroopa üksikisikute poolt omandatud gastroenteriidi ja kõhulahtisuse põhjustajatena, mis tekivad kahe tugeva patogeenina..

Antibiootikum võimaldab pärssida seedetrakti kaasnevat taimestikku, mis soosib nende bakterite arengut, takistades neil märkamatuks jääda, kuna nad vajavad kasvamist 72 tundi.

MacConkey Agar, mis on valmistatud 10% merevee mahust

See variant on kasulik fekaalide saastumise bakteriaalsete terviseindikaatorite, sealhulgas kolibakterite ja fekaalide kolibakterite hindamiseks puhke soolalahustes (rannad ja lahed)..

Cortez et al. 2013 näitasid, et sel viisil valmistatud keskkond suurendab oluliselt nende mikroorganismide taastumist soolalahuses, võrreldes destilleeritud veega valmistatud MacConkey agariga..

Seda seetõttu, et modifitseeritud sööt stimuleerib bakterite kasvu, mis on füsioloogiliselt seisvate seisundite "elujõulised, kuid mitte kultiveeritavad" seisundis, mistõttu nad ei ole tavapärases keskkonnas taastuvad.

Viited

  1. Lau SK, Woo PC, Hui WT jt. Cefoperazone MacConkey agari kasutamine. \ T Laribacter hongkongensis. J Clin Microbiol. 2003; 41 (10): 4839-41.
  2. "MacConkey Agar." Wikipedia, vaba entsüklopeedia. 4. aprill 2018, 18:16 UTC. 29. detsember 2018, 15:22 en.wikipedia.org
  3. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. (2009). Bailey & Scott'i mikrobioloogiline diagnoos. 12 ed. Argentina Panamericana S.A Toimetaja.
  4. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobioloogiline diagnoos. (5. väljaanne). Argentina, Redaktsioon Panamericana S.A..
  5. Cortez J, Ruiz Y, Medina L, Valbuena O. Mereveega valmistatud söötme mõju terviseindikaatoritele Chichiriviche spaades, Falcón osariigis, Venezuelas. Rev Soc Come Microbiol 2013; 33: 122-128
  6. García P, Paredes F, Fernández del Barrio M. (1994). Praktiline kliiniline mikrobioloogia. Cadizi ülikool, 2. väljaanne. UCA väljaannete talitus.