Cetrimida agari vundament, valmistamine, kasutamine



The cetrimidi agar või tetrimiid on selektiivne tahke kultiveerimiskeskkond, mis on mõeldud Pseudomonas aeruginosa. Selle aluseks on selle liigi jaoks iseloomulike pigmentide tootmise rõhutamine ja see on välja töötatud Kingi, Wardi ja Raney poolt loodud tehnilise agari modifikatsioonist..

Algne valem sisaldas magneesiumkloriidsoolasid, kaaliumsulfaati, pankrease želatiini lagundamist ja agar-agarit. Valemi modifitseerimine seisnes tsetrimiidi (tsetüültrimetüülammooniumbromiidi) ja glütserooli lisamises..

Cetrimide agar on kasulik proovide mikrobioloogiliseks uurimiseks, kui on olemas Pseudomonas aeruginosa. Tuleb märkida, et see bakter on väga oluline, sest kuigi see on osa tavalisest keskkonna mikrobiotikust, käitub see sageli nagu oportunistlik patogeen..

Seetõttu on üks kõige sagedasemaid selle idu põhjustatud probleeme haiglaravi infektsioonid, st need, mis esinevad haigla keskkonnas, rünnates depressiivse immuunsüsteemiga patsiente..

Teisest küljest on selle mikroorganismi niiskuse suhtes afiinsuse tõttu kõige haavatavamad saaste sihtmärgid: abistavad hingamisseadmed, ravimid, nebulisaatorid, veeallikad, kliimaseadmed, desinfektsioonivahendid, seebilahused, süstitavad lahused, avatud haavad. , kateetrid, kuseteede kateetrid.

Selles mõttes on cetrimide agar kasulik eelnevalt nimetatud elementide mikrobioloogiliste kontrollide ja põllukultuuride teostamiseks.

Indeks

  • 1 Sihtasutus
    • 1.1 Suuline tõlge
  • 2 Valmistamine
  • 3 Kasutamine
  • 4 Seeded
  • 5 Piirangud
  • 6 Kvaliteedikontroll
  • 7 Viited

Sihtasutus

Cetrimide agar põhineb söötme võimel soodustada kasvu P. aeruginosa, stimuleerivad nende pigmentide tootmist ja omakorda pärsivad teiste mikroorganismide kasvu.

Need omadused tulenevad funktsioonist, mida iga selle komponent täidab. Olemasolev želatiinipeptoon toimib lämmastiku, vitamiinide ja mineraalainete allikana. Glütserool või glütseriin toimib süsinikuallikana.

Cetrimide (tsetüültrimetüülammooniumbromiid) omakorda on aine, mis pärsib teiste bakterite kasvu kui P. aeruginosa, kaasa arvatud teised samasse perekonda kuuluvad liigid.

Inhibeerimine toimub seetõttu, et tsetramiid toimib katioonse detergendina, destabiliseerides enamiku bakterite plasmamembraani, välja arvatud P. aeruginosa ja mõned teised, kes suudavad ellu jääda.

Teisalt sisaldab see magneesiumkloriidi ja kaaliumsulfaati. Need ühendid stimuleerivad fenotüüpilist ekspressiooni, mis on seotud Pseudomonas aeruginosa mitmesuguste pigmentide tootmiseks, sealhulgas: püotsüaniin, pioverdiin, piorubiin, piomelaniin ja fluorestseiin. Lõpuks sisaldab see agar-agarit, mis annab sellele tahke konsistentsi.

Tõlgendamine

Selles agaris saadud kasvu tõlgendamine toimub järgmisel viisil:

Selle bakteri olemasolu nimetatud proovis on eeldatav tulemus ümmarguste, sile-roheliste, roheliste, pruunide või punakate pigmentidega, sinis-rohelise, rohelise, pruuni või punaka pigmendiga kolooniate jälgimisega, millele lisandub puuvilja lõhn (aminoatsetofenoon)..

Teisest küljest näitab see seda P. aeruginosa kollase rohelise kollakasrohelise pigmendi jälgimine, kui plaat puutub kokku ultraviolettvalgusega.

Tuleb märkida, et iga täheldatud värv on tingitud konkreetse pigmendi tootmisest. Sinikroheline pigment vastab püotsüaniini, rohelise kuni pioverdi, punaka kuni piorrubiini, pruuni kuni piomelaniini ja helekollakasrohelise fluorestsentsi ultraviolettvalguses tootmisel fluorestseiiniks..

Ettevalmistus

Kaaluge 43 g veetustatud söödet ja lahustage destilleeritud vees. Lisage 10 ml glütserooli. Võtke segu soojusallikale. Lase paar minutit, kuni see täielikult lahustub.

Autoklaav 121 ° C juures 15 minutit. Kui temperatuur on umbes 50 ° C, lastakse seista ja kasutada steriilsetes Petri tassides.

Laske tahkestuda, pöörata ümber, tellida plaatides ja hoida külmkapis kuni kasutamiseni. Cetrimidi agariplaatide istutamiseks tuleb need eelnevalt külmkapist eemaldada ja toatemperatuuril lasta..

Söötme lõplik pH peaks olema 7,2 ± 0,2.

Dehüdreeritud söötme värvus on beež ja preparaat on läbipaistmatu valge.

Kasutamine

Cetrimide agarit saab kasutada igat tüüpi proovide istutamiseks, mille puhul on olemas Pseudomonas aeruginosa. Seetõttu on see kasulik kõikides mikrobioloogia valdkondades (keskkonna-, tööstus-, kliinilised, vee- ja toidualad)..

On väga oluline analüüsida haiglate keskkondi ja seega olla võimeline rakendama korrigeerivaid vahendusi, kuna see mikroorganism jõuab patsientide poole patsientide poolt kasutatavate seadmete, ravimite, lahuste ja saastunud varude kaudu..

Sel viisil võib mikroorganism nakatada immunosupresseeritud patsientide alumiste hingamisteede, kuseteede ja haavad..

Samuti võib teha kolooniate arvu P. aeruginosa mikroobide piirnormide testides.

Külvatud

Cetrimide agarit võib kasutada primaarseks kultuuris. Plaat inokuleeritakse ühes selle servadest ja sealt jaotatakse see väljavoolu abil ülejäänud plaadile. Vedelaid proove võib külvata pinnale drigalski spaatliga.

Plaate inkubeeritakse aerobiosis temperatuuril 37 ° C 24 tundi inkubeerimisel.

Piirangud

-Väike protsent. \ T  Pseudomonas aeruginosa ei tooda püotsüaniini, nii et saate tõlgendada vale negatiivset.

-Selles keskkonnas inhibeeritakse mõningaid kliiniliselt olulisi Pseudomonas'e liike.

-Vaatamata kirjeldatud omadustele Pseudomonas aeruginosa, neid tuleb kinnitada täiendavate identifitseerimiskatsetega. Katse, mis ei tohiks puududa, on oksüdaasi test, see peaks olema positiivne.

-Mõned enterobakterid võivad kasvada selles söötmes ja arendada kollast pigmenti, kuid see erineb Pseudomonas aeruginosa milles plaadi ultraviolettvalgusele allutamisel fluorestsents puudub.

-Serratia marcescens õnnestub välja töötada ja toota roosa pigmendi.

-Kui cetrimidi agariga külvatud naastud on toatemperatuuril mõnda aega kokku puutunud, siis. \ T P. aeruginosa nad võivad kaotada ultraviolettvalguses täheldatud fluorestsentsi, kuid omadus taastub, kui seda inkubeeritakse uuesti temperatuuril 37 ° C.

Kvaliteedikontroll

Tsetrimiidi agari nõuetekohase toimimise testimiseks võib kasutada kontrolltüvesid, näiteks: Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027, Stenotrophomonas maltophilia ATCC 13637, Escherichia coli ATCC 25922 ja Staphylococcus aureus ATCC 25923.

Oodatavad tulemused on:

  • Et P. aeruginosa hea kasv, sinine-rohekas pigment ja positiivne fluorestseiin.
  • S. maltophilia ja S. aureus on osaliselt või täielikult inhibeeritud.
  • Eeldatakse, et Escherichia coli olema täielikult inhibeeritud.

Viited

  1. Callicó A, Cedré B, Sifontes S, Torres V, Pino Y, Callís A, Esnard S. Kliiniliste isolaatide fenotüüpiline ja seroloogiline iseloomustus. Pseudomonas aeruginosa. VacciMonitor. 2004; 13 (3): 1-9.
  2. Laborid Conda Pronadisa. Cetrimide agari alus. 2014. Saadaval aadressil: condalab.com
  3. Laboratooriumid Britania. Cetrimida agar. 2015. Saadaval aadressil: britanialab.com
  4. BD laboratooriumid BD Pseudosel agar (Cetrimide agar). 2013. Saadaval aadressil: bd.com
  5. Francisco Soria Melguizo Laboratory, C.A. Cetrimide agar. 2009. Saadaval aadressil: http://f-soria.es