Kultuurikandjate ettevalmistamine, millised need koosnevad, eesmärgid ja sammud

The söötme valmistamine See on tavaline metoodika, mida kasutatakse laborites soovitud mikroorganismide kasvuks. Kultuurikeskkonnaks on tahked, vedelad või pooltahked preparaadid, millel on kõik mikroobide populatsiooni arenguks vajalikud toitained.

Üldiselt on mikroorganismide kasvatamise vahendid rikas valkude ja aminohapete poolest ning sisaldavad tavaliselt mõnda komponenti, mis soodustab uuritava organismi, näiteks vitamiinide, vere, seerumi kasvu..

Üldist või universaalset kultuurisöödet ei ole, kuna selle koostis varieerub vastavalt huvipakkuva mikroorganismi vajadustele. Mõned bakterid võivad areneda ükskõik millises söötmes, kuid teistel on erinõuded.

Indeks

• 1 Mis see koosneb??
  • 1.1 Agar
  • 1.2 Vedelikud
  • 1.3 Väljavõtted
  • 1.4 Peptoonid
  • 1.5 Amortisaatorid
• 2 Eesmärgid
• 3 Meedia tüübid
  • 3.1 Põhineb selle koostisel
  • 3.2 Põhineb mikroorganismi tüübil
• 4 sammu
• 5 Viited

Mis see koosneb??

Mikroorganisme, nagu seened ja bakterid, ei saa nende väikese suuruse tõttu individuaalselt uurida. Seetõttu tuleb neid kasvatada kunstlikes vahendites, mis võimaldavad elanikkonna märkimisväärset suurenemist.

Näiteks, kui me tahame baktereid uurida, peame neile andma õiged tingimused, et nad saaksid paljuneda ja moodustada koloonia (mida võib näha palja silmaga).

Kultuurikeskkonna valmistamine varieerub suuresti sõltuvalt mikroorganismi tüübist, mida soovitakse kasvatada. Enne selle ettevalmistamist on vaja teada töökoha põhilisi toitumisvajadusi.

Järgnevalt kirjeldatakse kõige tavalisemaid kultuurisöötmes kasutatavaid komponente, et neil oleks üldine idee nende valmistamiseks:

Agar

Seda kasutatakse põllukultuurides geelistava ainena ja lisatakse tahke või pooltahke keskkonna otsimisel. Esimene tahkestav aine, mida kasutati sööde valmistamiseks, oli želatiin, kuid aastal 1883 viidi agar W. Hesse bakterioloogia maailma..

Bakterioloogilisel agaril on põhikomponendiks vetikast ekstraheeritud keerukate harude polüsahhariid. Seda ühendit kasutatakse tavaliste toiduainete, näiteks jäätise ja moosi paksendajana.

See on mikrobioloogia väga väärtuslik element mitmel põhjusel. Peamiselt sellepärast, et mikroorganismid ei saa seda lagundada, veelduvad temperatuuril 100 ° C ja jäävad vedelasse olekusse, kuni saavutavad 45 ° C või vähem.

Juhul, kui soovite tahket keskkonda valmistada, peaks agari kontsentratsioon olema umbes 1,5%, samal ajal kui pooltahked ained tuleks valmistada 0,3 kuni 0,5%..

Vedelikud

Patogeensete organismide kasvatamiseks on vaja kehavedelikke, et nad saaksid areneda nii nagu nende looduslikus keskkonnas. Sel põhjusel lisatakse terve või defibrilleeritud veri. Vedelik ekstraheeritakse tervest loomast ja pärast steriliseerimist lisatakse söötmele.

Väljavõtted

Need saadakse erinevatest loomade osadest (nagu liha või maks) või köögiviljadest (seemned) ja töödeldakse tahke kontsentraadi saamiseks pastana või pulbrina. Kõige tavalisemad on pärm, linnased ja liha.

Peptoonid

Need orgaanilised ühendid saadakse loomsete või taimsete kudede ensümaatilisel või keemilisel hüdrolüüsil. Eesmärgiks on lisada aminohapetega rikas sisu, mis on valkude põhiosad.

Amortisaatorid

Puhvrid või puhversüsteemid väldivad äkilisi pH muutusi ja aitavad säilitada optimaalset vahemikku, mida keha talub.

Enamik organisme võib areneda korralikult pH 7 juures, kuigi mõned bakterid eelistavad leeliselist söödet. Siiski on baktereid, mis takistavad pH muutusi väärtuste 6 ja 9 vahel.

PH-le tundlikel liikidel ei tekita kahjustusi vesiniku- või hüdroksüülioonide liigne kogus, vaid nõrkade hapete või aluste suurenemine, mis võivad rakku tungida.

Samuti lisatakse indikaatorid, mis näitavad pH jälgimist ja käärimise või muude protsesside põhjustatud kõrvalekallete vältimist.

Eesmärgid

Kultuurikeskkonna ettevalmistamisel on peamine eesmärk lisada kõik vajalikud komponendid, et võimaldada isoleeritava organismi edukat arengut. Soovitud söötme saamiseks tuleb kindlaks määrata kõige tõhusam komponentide ja toitainete kombinatsioon.

Edukate majanduskasvu tagamiseks on oluline nii söötme ettevalmistamine kui ka säilitamine, kuna need sammud sõltuvad keskkonna koostisest ja toitainete kättesaadavusest..

Tuleb arvestada, et mikroorganismide kasvatamine on ülesanne, mida mõjutavad mitmed kultiveerimiskeskkonna välised tegurid, nagu näiteks vastuvõetud valguse intensiivsus, temperatuur ja keskmise happesuse või leelisuse tase. Seetõttu tuleb arvesse võtta kõiki neid muutujaid.

Meedia liigid

Põhineb selle koostisel

Selle koostise põhjal on kolm peamist liiki kultuure: looduslikud või empiirilised, poolsünteetilised ja määratletud sünteetilised või keemilised vahendid.

Looduslik keskkond

Looduslikes keskkondades ei ole täpne koostis teada. Nende hulka kuuluvad sellised koostisosad nagu piim, lahjendatud veri, köögiviljamahlad, liha ja peptiidide ekstraktid ja infusioonid. Majanduslikel põhjustel lisatakse sageli odavaid komponente nagu soja ekstrakt, vadak, melass jne..

Poolsünteetilised kandjad

Seda nimetatakse poolsünteetiliseks keskkonnaks, kui selle koostis on osaliselt tuntud. Iga agarit sisaldav sööt muutub poolsünteetiliseks keskkonnaks.

Nende hulgas on muuhulgas ka papa dekstroosi agar, czapek-dox agar, kaera agar, peptoon-liha agar,.

Sünteetiline või keemiliselt määratletud keskkond

Sellisel juhul on söötme koostis süsiniku, lämmastiku, väävli, fosfori ja muude kasvufaktorite allikate poolest täielikult teada. See on väga kasulik, kui soovid saada teistele teadlastele reprodutseeritavad tulemused.

Niinimetatud "spetsiaalsete kasvunõuetega mikroorganismide" puhul on vaja lisada vajalikud komponendid. Sellist tüüpi näide on Lactobacillus.

Põhineb mikroorganismi tüübil

Samamoodi on kultuurikeskkonnas veel üks klassifikatsioon, mis põhineb selles kasvava mikroorganismi tüübil. Selle põhimõtte järgimisel on meil järgmised rikastamise, selektiivsuse ja diferentseerimise üldised vahendid. Igaüks neist on kirjeldatud allpool:

Üldised vahendid

Need tunnistavad paljude mikroorganismide arengut. Kui mistahes organism vajab kasvuks eritingimusi, ei saa ta seda tüüpi kultuuris edukalt areneda.

Rikastusvahendid

Rikastamise vahendid soodustavad teatud tüüpi mikroorganismide kasvu, kuid ühtegi ainet ei ole lisatud selleks, et vältida teiste mikroobide kasvamist selles..

Selektiivne meedia

Nad otsivad mikroorganismi konkreetset kasvu, nimetavad seda seenteks, bakteriteks, algloomadeks. Selleks takistavad nad teiste arengut.

Selle eesmärgi saavutamiseks on võimalik lisada surmavaid keemilisi ühendeid suure hulga mikroorganismide jaoks ja kahjustada huvipakkuvaid organisme või lisada energiaallikaid, mida saab pärida ainult soovitud mikroobiga.

Patoloogilise mikroorganismi kasvatamiseks kasutatakse meditsiiniliste proovide võtmisel selektiivset söödet. Siin on vaja soodustada patogeeni kasvu ja pärssida normaalse mikroobse taimestiku arengut patsiendilt.

Bismutsulfiti agar ei võimalda näiteks grampositiivsete bakterite ja suure hulga bakterite kasvu seedetrakti õõnsuses. Seetõttu kasutatakse seda kõhutüüpi palavikku põhjustavate gramnegatiivsete bakterite kasvatamiseks, Salmonella typhi väljaheidete proovides.

Erinev meedia

See tüüp kasutab huvipakkuva organismi mõnda diagnostilist omadust (näiteks selle ainevahetuse iseärasused), et neid oleks võimalik tuvastada samas keskkonnas kasvava teise liigi vastu..

Nii diferentseeritud meedia kui ka selektiivne meedia on väga kasulikud kliinilise mikrobioloogia ja rahvatervise valdkonnas, kuna need erialad peavad tuvastama spetsiifiliste mikroorganismide olemasolu, mis on seotud halva hügieenitingimustega..

Taimele võib lisada indikaatorseid aineid, mis annavad soovitud kolooniale eripära. Näiteks lisatakse agaro-eosiin-metüleensinine (lühendatud EMB) ja MacConkey-agar laktoosi ja pH indikaatoriga.

Seega, kui kolooniat arendatakse nendes söötmetes, mis on võimelised fermenteerima laktoosi ja tootma aldehüüde, võib neid täheldada erivärvides.

Sammud

Praegu võib kultiveerimiskeskkonda osta lüofiliseeritud kujul. Seetõttu on preparaat hõlbustatud ja ainult toode on hüdraaditud. Sisu tuleb kaaluda (võttes arvesse lõplikku kogust, mida soovite valmistada) ja lahustada destilleeritud vees, järgides kõiki toote juhiseid..

Vedelate söötmete sisaldus tuleb järgnevaks steriliseerimiseks jaotada soovitud mahutitesse (Petri tassid, torud jne). Tahke söötme levitamiseks on vaja sulatada see mikrolaineahju abil või allutada materjal veevannile. Söötme pH tuleb reguleerida.

Tavaliselt kasutatakse agarit testtorudes või Petri tassides. Kui agar tahkestub kaldasendis, sobiva nurga all nii, et lõppterminal on diagonaalne, siis on see seade tuntud kui flöödipiik või kaldtorud. Kui agar tahkub täielikult vertikaalasendis, nimetatakse seda "sügavaks"..

Pärast kandja steriliseerimist autoklaaviga lastakse neil jahtuda. Neid tuleb käsitseda mikroorganismidest vabas keskkonnas, kõige tavalisem on töötada valgustatud kergema valguga, mis tagab selle läheduses aseptilise keskkonna..

Viited

1. Celis, J. E. (2006). Rakubioloogia: labori käsiraamat (Vol. 2). Elsevier.
2. Finegold, S.M., Bailey, W.R., Baron, E.J., Fineglod, S.M., & Scott, E.G.. Bailey Scott: mikrobioloogiline diagnoos. Pan American Medical.
3. Olivas, E. (2004). Mikrobioloogia I ja II praktika käsiraamat ja parasiitoloogia. Ciudad Juárezi autonoomne ülikool.
4. Schlegel, H. G., & Zaborosch, C. (1993). Üldine mikrobioloogia. Cambridge'i ülikooli press.
5. Tortora, G. J., Funke, B. R. & Case, C. L. (2007). Mikrobioloogia tutvustus. Ed. Panamericana Medical.